利用枯草芽孢衣壳蛋白表面展示β-半乳糖苷酶

摘要：

分别将枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis 168）芽孢衣壳蛋白CotB、CotC、CotG和CotX的启动子和编码序列与来自嗜热脂肪芽孢杆菌（BacillusstearothermophilusIAMll001）的β-半乳糖苷酶基因bgaB进行重组，构建融合表达cotB—bgaB、eotC—bgaB、eotG—bgaB和eotX—bgaB的整合型重组质粒。将4种重组质粒分别转入枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis168（trp。），获得了能在芽孢表面展示的重组菌株PB701、PB702、PB703和PB704。经Westernblot检测，4种重组菌株均表达了预期分子量的融合蛋白，初步表明β-半乳糖苷酶被锚定在重组菌株的芽孢表面。以oNPG为底物测定4种重组菌株芽孢表面展示β-半乳糖苷酶的水解能力，得到的酶活分别为0．14、0．06、0．22和0．20U／mL。

关键词：芽孢、表面展示、β-半乳糖苷酶、Western、blot

所属期刊栏目：38

分类号：Q936(微生物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;江南大学食品科学与技术国家重点实验室目标导向项目;江南大学博士研究生科学研究基金

在线出版日期：2012-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5