Thermomyces lanuginosus ZJB09222脂肪酶基因克隆及在大肠杆菌中的表达
Thermomyces lanuginosus脂肪酶(简称TLL)是具有重要商业应用价值的脂肪酶之一。运用RT-PCR技术,从Thermomyces lanuginosus ZJB09222基因组中克隆得到885bp脂肪酶基因cDNA序列,其结构基因编码蛋白包含292个氨基酸。将脂肪酶基因cDNA序列开放阅读框克隆到大肠杆菌表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),构建了基因工程菌E.coliBL21/pET28b—TLL。诱导表达后SDS—PAGE电泳显示该脂肪酶分子量约为32ku。筛选获得廉价重组菌培养基,表达条件优化结果表明,当OD600约为0.6~0.8时,加入IPTG至终浓度为0.1mmol/L,在28℃诱导培养7h,酶活达到41U/mL。
脂肪酶、Thermomyces、lanuginosus、克隆、大肠杆菌、诱导表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
2012-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
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