Thermomyces lanuginosus ZJB09222脂肪酶基因克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要：

Thermomyces lanuginosus脂肪酶（简称TLL）是具有重要商业应用价值的脂肪酶之一。运用RT-PCR技术，从Thermomyces lanuginosus ZJB09222基因组中克隆得到885bp脂肪酶基因cDNA序列，其结构基因编码蛋白包含292个氨基酸。将脂肪酶基因cDNA序列开放阅读框克隆到大肠杆菌表达载体pET-28b中，转化大肠杆菌BL21（DE3），构建了基因工程菌E．coliBL21／pET28b—TLL。诱导表达后SDS—PAGE电泳显示该脂肪酶分子量约为32ku。筛选获得廉价重组菌培养基，表达条件优化结果表明，当OD600约为0．6～0．8时，加入IPTG至终浓度为0．1mmol／L，在28℃诱导培养7h，酶活达到41U／mL。

关键词：脂肪酶、Thermomyces、lanuginosus、克隆、大肠杆菌、诱导表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2012-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：56-60