PCR结合生理生化鉴定对冷藏带鱼主要细菌菌相组成分析
将传统的微生物生理生化鉴定技术与16SrDNA分子生物学方法相结合,并通过系统发育树分析,对冷藏带鱼贮藏期间的主要细菌组成比例进行研究。样品在(44.1)℃贮藏,分别于不同贮藏时间取样,对各个阶段的微生物菌落进行分离纯化、形态观察和部分生理生化鉴定,对最终得到的细菌纯培养物直接提取DNA,作16SrDNAPCR扩增,产物经测序后于NCBI与已知序列进行相似性比对,最终得到13株具有典型特征的纯菌株。结果得出,冷藏带鱼在货架期终点时,其主要微生物的种类与所占比例依次为:腐败希瓦氏菌(Shewanellaputrefa—ciens34.7%)、荧光假单胞菌(Pseudomonas以uorescem14.5%)、松鼠葡萄球菌(Staphylococcussciuri10.2%)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila8.2%)、弧菌(Vibriorumoiensis6.1%)、恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida6.1%)、绿色气球菌(Aerococcusviridans4.1%)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus4.1%)、蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus4.O%)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa2.0%)、嗜冷杆菌(Psychrobactersp.2.0%)、成团肠杆菌(Enterobacteragglomerans2.O%)、约氏不动杆菌(Acinetobacterjohnsonii2.0%),其中腐败希瓦氏菌为带鱼冷藏期间的主要优势腐败菌,假单胞菌在带鱼冷藏过程中的所占比例大小依次为荧光假单胞菌〉恶臭假单胞菌〉铜绿假单胞菌。
带鱼、冷藏、聚合酶链反应(PCR)、生理生化鉴定、菌相变化
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TS252.54(食品工业)
“十二五”国家支撑计划项目2011BAD24802;上海海洋大学博士启动基金A-2400-11-0202;上海市教育委员会重点学科建设项目资助J50704
2012-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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