麦芽糖α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的分泌表达

摘要：

采用重叠PCR方法在麦芽糖α-淀粉酶编码基因5’端添加地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因信号肽编码区,获得重组基因BlMa。重组基因与芽孢杆菌表达载体pHY-P43连接后直接转化枯草芽孢杆菌,获得重组质粒pHY-P43-BlMa。枯草芽孢杆菌淀粉酶基因缺陷株1A717被用作BlMa基因表达宿主菌,重组菌命名为Bacillus subtilis/pHY-P43-BlMa。酶活检测和SDS-PAGE电泳均显示,B.subtilis/pHY-P43-BlMa表达的重组麦芽糖淀粉酶（BlMa）全部分泌到培养液中。HPLC检测表明,BlMa催化可溶性淀粉水解产物主要为麦芽糖。对B.subtilis/pHY-P43-BlMa摇瓶发酵条件进行优化。获得优化发酵培养基配方：10%玉米淀粉,2.5%药媒,0.3%（NH4）2SO4,0.03%CaCl2,0.1%NaH2PO4,在优化条件下重组菌发酵酶活为5.9 U/mL。

关键词：麦芽糖α-淀粉酶、分泌表达、枯草芽孢杆菌

所属期刊栏目：37

分类号：Q939.124(微生物学)

资助基金：国家863高技术研究发展计划2006AA10Z307

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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