表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化

摘要：

以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctie lipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40 g/L、硫酸铵4 g/L、PTM14 mL/L和CaSO4 10 mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6 mL/(L·h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4 mL/(L·h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳.最终单位菌体酶活力可达348.4 U/g,比甘油含量40 g/L、硫酸铵10 g/L、PTM14.35 mL/L、CaSO4 0.93 g/L,以6.4 mL/(L·h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲酵的未优化条件下提高34.8%.最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高.

关键词：发酵优化、酵母表面展示、南极假丝酵母脂肪酶B、高密度

所属期刊栏目：36

分类号：TS2(食品工业)

资助基金：广东省工业攻关重点项目2008A01090002

在线出版日期：2010-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：29-34