重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性

摘要：

N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAO)具有广泛的底物选择性,可用于多种活性氨基酸的酶法拆分,具有广阔的工业应用前景.文中采用多种洗涤剂对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体进行洗涤去杂,并用DEAESepharose Fast Flow层析柱和三缓冲体系作为复性系统对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙硫基酶包涵体进行复性实验.结果表明,4mol/L尿素与0.5%Triton X-100联合洗涤可以大量去除杂质;三缓冲体系能有效地实现重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体的柱上复性.在流速为0.5 mL/min,尿素梯度为21 mL,尿素终浓度为1.8mol/L,蛋白质上样量为0.99 mg的实验条件下,蛋白回收率和复性酶比活分别达到52%和10.27 U/mg.

关键词：离子交换、重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶、包涵体、复性

所属期刊栏目：34

分类号：TS2(食品工业)

资助基金：江苏省高校青蓝工程项目;南京工业大学国家自然科学基金预研项目

在线出版日期：2008-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：11-15