基于RT-ddPCR技术的食品中诺如病毒定量检测

摘要：

目的:构建基于逆转录微滴式聚合酶链式反应(reverse transcriptase droplet digital polymerase chain reaction,RT-ddPCR)技术的食品中诺如病毒(norovirus,NoV)定量检测方法.方法:筛选引物探针,建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步法RT-ddPCR检测体系,确定特异性.利用NoV RNA标准物质和MS2噬菌体RNA确认RT-ddPCR检测体系的定量限、准确度和重复性.制备人工阳性样品,分析MS2噬菌体对定量结果的影响.结果:3个RT-ddPCR检测体系具有良好的特异性、准确度和重复性,NoV RT-ddPCR检测体系的定量限包含104～100 拷贝/μL 5个数量级,MS2噬菌体RT-ddPCR检测体系定量限与NoV相当,添加与不添加MS2噬菌体的人工阳性样品的定量结果无显著差异(P≥0.05).结论:NoVRT-ddPCR检测体系可准确定量NoVRNA,MS2噬菌体不影响定量结果,可作为过程控制的模式病毒被添加到食品中,指示回收率,计算食品中NoV实际载量.

关键词：逆转录微滴式数字聚合酶链式反应、诺如病毒、MS2噬菌体、回收率

所属期刊栏目：43

分类号：R155.5(营养卫生、食品卫生)

资助基金：国家重点研发计划2017YFC1601602

在线出版日期：2022-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：313-320