实时荧光跨越式滚环等温扩增结合PMA检测虾产品中的活副溶血性弧菌

摘要：

目的:为快速检测虾产品中的活副溶血性弧菌,建立一种实时荧光跨越式滚环等温扩增(real-time fluorescent saltatory rolling circle amplification,RF-SRCA)与叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)染料相结合的检测方法.方法:依据副溶血性弧菌的特异性基因toxR设计并筛选引物,对PMA-RF-SRCA检测方法进行特异性、灵敏度及检出限分析,并与PMA-实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法进行对比.对76份样品进行检测,以GB 4789.7-2013方法为标准,对PMA-RF-SRCA方法的相对敏感性、相对特异性、相对符合率进行计算,以对本方法的实用性进行评估.结果:此方法的引物特异性良好,12株副溶血性弧菌结果均呈阳性,18株非副溶血性弧菌结果均呈阴性;PMA-RF-SRCA法灵敏度为3.2×100 CFU/mL,检出限为2.08×101 CFU/g,此方法的灵敏度是PMA-real-time PCR的100倍.经过实际样品检测,PMA-RF-SRCA方法的敏感性、特异性、符合率分别为100.00％、96.00％和98.68％.结论:PMA-RF-SRCA方法特异性强、灵敏度高,可用于虾产品中的活副溶血性弧菌的检测与筛查.

关键词：实时荧光跨越式滚环等温扩增;叠氮溴化丙锭;副溶血性弧菌;toxR基因;食品;检测

所属期刊栏目：42

分类号：TS201(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金;河北省自然科学基金重点项目;河北省重点研发计划;中央引导地方科技发展资金项目;河北农业大学食品加工学科群经费资助项目

在线出版日期：2022-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：289-295