黄杆菌褐藻胶裂解酶的高效表达及其在褐藻寡糖制备中的应用

摘要：

研究黄杆菌褐藻胶裂解酶基因(rFlAlyA)在枯草芽孢杆菌中的高效表达,高密度发酵48 h最高酶活力为2550 U/mL,蛋白质量浓度达4.5 mg/mL.经(NH4)2SO4沉淀和SP强阳离子交换柱纯化后得到电泳级纯酶,分子质量约为30 kDa.褐藻胶裂解酶rFlAlyA最适pH值为7.5,在pH 4.0～11.0范围内可保持80％以上酶活力;最适温度为50℃,在50℃及以下可保持80％以上酶活力.底物特异性分析表明,rFlAlyA特异性降解聚甘露糖醛酸片段,最短链底物为甘露糖醛酸三糖.rFlAlyA在最适条件下酶解褐藻酸钠4 h后还原糖质量浓度达33 mg/mL,底物转化率为70.1％,电喷雾电离-质谱分析酶解产物的聚合度(degree of polymerization,DP)为1～8,离子色谱分析显示DP=3时相对含量最高,为34.0％.结果表明,经枯草芽孢杆菌高效表达的rFlAlyA可用于制备褐藻寡糖.

关键词：褐藻胶裂解酶、黄杆菌、枯草芽孢杆菌、高密度发酵、褐藻寡糖

所属期刊栏目：42

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金："十三五"国家重点研发计划重点专项2017YFD0400204

在线出版日期：2021-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：145-152