水产品中创伤弧菌ddPCR定量方法的建立

摘要：

选取创伤弧菌单拷贝基因met为靶基因,设计引物探针,建立对创伤弧菌准确定量的微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)方法,并进行特异性、灵敏度和重复性实验,同时与实时PCR(real-time PCR)方法进行比较.结果显示,所建立的ddPCR方法可以快速、高效地检测出创伤弧菌,细菌纯培养物中其定量限可达323拷贝数/mL,检测限可达61拷贝数/mL,人工污染牡蛎样品中能最低能检测到1.13×102拷贝数/g的目标菌.对人工污染样品中目标菌的检测,ddPCR的定量结果约为平板计数结果的1.4倍,比real-time PCR方法的检测更加稳定准确.本研究建立的ddPCR检测方法能快速准确、特异、灵敏地定量检测创伤弧菌.

关键词：微滴数字聚合酶链式反应、创伤弧菌、实时荧光聚合酶链式反应

所属期刊栏目：41

分类号：R155.5(营养卫生、食品卫生)

资助基金："十三五"国家重点研发计划重点专项;国家质量监督检验检疫总局科研项目

在线出版日期：2020-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：305-311