10.7506/spkx1002-6630-20180213-154
花生过敏原Ara h1蛋白的原核表达及致敏性分析
从花生中提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应得到花生过敏原Ara h 1基因,构建pET-28a-Ara h 1表达载体,转入Rosetta (DE3)宿主表达菌中诱导产物表达,用镍离子亲和层析法纯化得到目的蛋白.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示目的蛋白分子质量约为75 kDa,与预计相符;经质谱鉴定为Ara h 1蛋白.用BALB/c小鼠模型评价重组Arah 1蛋白的致敏性结果显示,重组Ara h 1蛋白致敏小鼠血清中特异性抗体、Th2型细胞因子、组胺含量升高,空肠和肺组织发生病变,表明重组Arah 1蛋白可以导致小鼠发生Th2型过敏反应,且有与天然Ara h 1蛋白相似的致敏性.同时RBL细胞模型结果显示重组Ara h 1蛋白还可导致RBL细胞脱颗粒,释放β-己糖苷酶,进一步表明重组Ara h 1蛋白具有致敏性.
Ara h 1过敏原、重组蛋白、致敏性、BALB/c小鼠、RBL细胞
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Q789(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金青年科学基金项目31201306
2019-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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121-127