极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达

摘要：

为探索极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的高效分泌表达条件,对来源于枯草芽孢杆菌的9种Sec分泌途径信号肽进行筛选,结果显示信号肽YfkN的引导分泌效率最高.在此基础上,为进一步优化PFA的分泌表达,对信号肽YfkN的Ile3和Gln4进行饱和突变,并比较不同突变体的引导分泌效率.结果表明突变体I3G/Q4R的引导分泌效率最高,重组枯草芽孢杆菌的胞外α-淀粉酶活力高达715 U/mL.重组α-淀粉酶PFA的最适反应pH值为5.0,最适反应温度为100℃,于100℃的半衰期长达13 h,并且不依赖于Ca2+.结果表明,采用信号肽I3G/Q4R,极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达,这有利于其在淀粉液化工艺中的应用.

关键词：极端嗜热酸性α-淀粉酶、枯草芽孢杆菌、信号肽、分泌表达、饱和突变

所属期刊栏目：39

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金项目31501422;江西省青年科学基金项目20171BAB214003;江西省重点研发计划项目20171BBF60006;江西省科学院资助项目2017-YCXY-13

在线出版日期：2018-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：100-108