草苁蓉多糖对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡的抑制作用

摘要：

目的:研究草苁蓉多糖( Boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡的抑制作用.方法:利用叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,tBHP)损伤人脐静脉血管内皮细胞制备细胞氧化应激损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞存活率,分光光度法检测细胞内丙二醛(malondialdelyde,MDA)水平、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)水平.采用二氯荧光乙酰乙酸盐(dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,采用JC-1荧光染色法观察细胞线粒体跨膜电位(mitochondrial membrane potentials,ΔΨm)水平,采用Hoechst染色和原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法观察细胞凋亡情况.Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、细胞色素c (cytochrome c,Cyt c)、Bid片段(truncated Bid,tBid)、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达情况.结果:BRPS提高tBHP损伤的内皮细胞存活率,降低细胞ROS水平,减少MDA生成,提高SOD活性与GSH水平,升高ΔΨm水平,抑制细胞凋亡.Western blot结果显示,BRPS降低胞浆Cyt c、线粒体tBid水平,减小细胞Bax/Bcl-2比值,抑制Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活化.结论:BRPS对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡具有抑制作用,机制可能与线粒体凋亡途径和死亡受体途径均有关.

关键词：草苁蓉、多糖、血管内皮细胞、叔丁基过氧化氢、凋亡

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分类号：TS201.2;R285.5(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金地区科学基金项目81760659,81360651,81160539

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：127-133