鲜切果蔬中4种病原微生物多重PCR检测技术

摘要：

研发可同时检测鲜切果蔬中的单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法.根据单核细胞性李斯特菌加inlA基因、鼠伤寒沙门菌invA基因、大肠杆菌O157∶H7 wzy基因、金黄色葡萄球菌nuc基因设计及筛选出4对引物.对多重PCR体系及条件进行优化.该方法对单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的检出限分别为3.5×106、1.6×105、2.4×105、4.8×105 CFU/mL.将优化的多重PCR方法对不同接种量富集后验证,结果表明,经过9h富集后,该方法检出限为1CFU/mL.该方法在鲜切莴苣、鲜切黄瓜、鲜切木瓜、鲜切哈密瓜中应用同样可扩增出4条目标菌.因此,利用所建立的多重PCR方法对鲜切果蔬中侵染的病原菌检出限可达到1 CFU/g.该方法相较于传统的培养检测方法具有节约大量的劳力、试剂、时间等优点,检测时间也由原来的5～7 d缩短至9～11h,对于企业或分析检验中心大批量样品的监测具有指导意义.

关键词：多重PCR、快速检测、食源性病原微生物、鲜切果蔬

所属期刊栏目：39

分类号：TS207.4(食品工业)

资助基金：“十三五”国家重点研发计划重点专项2016YFD0400903;国家自然科学基金面上项目31471923,31172009;“十二五”国家科技支撑计划项目2012BAD38B05

在线出版日期：2018-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：276-283