金银花过氧化物酶的三相分离纯化及酶学性质

摘要：

采用三相分离法提取纯化金银花中过氧化物酶,结果表明最优纯化条件为pH5.60、硫酸铵质量浓度39.49g/100mL、提取液与叔丁醇体积比1:1.38,在该条件下纯化倍数为5.849,回收率为87.64%.金银花过氧化物酶比活力为1021.6U/mg,色素清除率为92%;酶学性质研究表明:金银花过氧化物酶最适温度为30℃,热稳定范围为10~40℃;最适pH值为5,pH值稳定范围为4~7.在金银花过氧化物酶催化的双底物酶促反应中,当H2O2浓度一定时,酶对愈创木酚的Km值为8.12
l/L,vmax值为1.71mmol/(min·L).当愈创木酚浓度一定时,H2O2的Km值为0.822mmol/L,vmax值为1.38mmol/(min·L).金银花过氧化物酶与底物的亲和力由强到弱依次是邻苯三酚、邻苯二酚、联甲氧基苯胺、愈创木酚.Ca2+、Cu2+、Zn2+对金银花过氧化物酶有激活作用,Mg2+、Mn2+、柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸、亚硫酸钠、偏重亚硫酸钠、十二烷基磺酸钠对金银花过氧化物酶有不同程度的抑制作用.

关键词：金银花、过氧化物酶、三相分离法、酶学性质

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分类号：TS201.2(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金联合基金项目U1304330

在线出版日期：2018-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：20-27