双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用

摘要：

目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其抗血栓作用.方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解.酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化,得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽,将此肽命名为PAAP并测定其急性毒性作用.采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)诱导的血小板聚集实验,研究PAAP的抗血栓作用.结果:选取碱性蛋白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解,经过分离纯化后得到一条氨基酸序列:脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸(Pro-Val-Glu-Arg-Lys).经测定,该寡肽的体外抗凝活力可达(1320.0±20.3)U/g.PAAP的最大耐受量为11.0 g/(kg·d)且未出现小鼠异常及死亡现象,体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用.结论:从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用.

关键词：双齿围沙蚕、抗凝血肽、碱性蛋白酶、分离纯化、抗血栓

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分类号：R282.77(中药学)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金项目81001393;2015年度国家星火计划项目2015GA700044;国家海洋局重大计划项目2015862;浙江省科技厅重大科技专项计划项目2013C03036;浙江省自然科学基金项目LS15H30001;浙江省自然科学基金青年资金项目LQ16H300001;舟山市公益类科技项目2015C31012

在线出版日期：2018-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：171-177