N-糖基化对β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中异源表达的影响

摘要：

为研究N-糖基化对里氏木霉β-甘露聚糖酶(β-mannanase,Man1)在毕赤酵母GS115中异源表达的影响,采用定点突变的方法,将Man1上3个N-糖基化修饰位点(N131、N158和N329)上的天冬酰胺用中性谷氨酰胺取代.结果发现,N-糖基化位点的突变对Man1的转录水平无明显影响,突变后获得的Man1表观分子质量有轻微下降,与Man1相比,3个突变体N131、N158和N329的甘露聚糖酶活力分别降低了85.43％和79.48％和16.3％;而热稳定性分别提高了7.87％、13.5％和15.37％.由此可见,N-糖基化修饰对于β-甘露聚糖酶的高效表达是必需的,其中N131和N158糖基化位点尤为重要,但是会稍微降低β-甘露聚糖酶的热稳定性.

关键词：β-甘露聚糖酶、N-糖基化、定点突变、酶活力、热稳定性

所属期刊栏目：38

分类号：Q55(酶)

资助基金：天津科技大学青年教师创新基金项目2014CXLG10;工业发酵微生物教育部重点实验室暨天津市工业微生物重点实验室天津科技大学开放基金项目2014IM101;天津市自然科学基金重点项目16JCZDJC31800

在线出版日期：2017-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：86-91