单增李斯特菌prfA基因缺失菌株的构建及其生物学特性鉴定

摘要：

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种风险较高的食源性致病菌,其绝大多数毒力基因的表达均受到由prfA基因编码的PrfA (positive regulatory factor A)蛋白全部或部分调控.使用同源重组的方法敲除Lm野生菌株EGDe的prfA基因,并通过测定生长曲线、毒力基因表达和侵袭Caco-2细胞能力等探讨单缺失菌株EGDe-△prfA生物学特性.通过测定生长曲线显示prfA敲除株和野生型EGDe二者生长状态无差异;运用实时定量荧光聚合酶链式反应检测EGDe-△prfA的主要毒力基因表达,结果显示plcA、plcB毒力基因的表达量分别上升至原来的2.5倍和2倍,inlA、inlB、inlC、actA、vip等均呈下降趋势,pr-fA基因表达量趋向于零;侵袭Caco-2细胞结果显示EGDe-△prfA侵袭数为野生株的1/5.该基因缺失菌株的构建及生物学特性研究对食源性致病菌EGDe致病机理研究具有重要意义并且提供了重要材料.

关键词：单核细胞增生性李斯特菌、prfA、基因敲除、生物学特性

所属期刊栏目：38

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31371776;上海市科委“科技创新行动计划”长三角科技联合攻关领域项目15395810900;上海理工大学研究生创新基金;上海理工大学微创励志创新基金

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：12-17