通用多重不对称PCR结合寡核苷酸芯片检测7种食源性致病菌

摘要：

应用通用多重不对称聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和寡核酸芯片技术建立一种同时检测7种常见食源性致病菌的方法.每种致病菌上游或下游引物5'端连接一段异源的共有序列.以荧光标记的该共有序列作为通用引物,与限制性特异引物经一步多重不对称PCR同时获得所有目标菌的单链标记靶序列,可被芯片上固定的特异性寡核苷酸探针捕获.通过芯片扫描、分析荧光信号完成检测.标准菌株检测结果证实,该方法可特异地检测单一和混合感染的目标菌,基因组DNA的检测灵敏度为0.1～1 pg.95份模拟污染和零售食品样本芯片检测结果与常规的分离与生化鉴定及荧光定量PCR结果一致.建立的寡核苷酸芯片方法可为快速、特异、灵敏及高通量地鉴定食源性致病菌提供一种有效的检测手段.

关键词：食源性致病菌、通用引物、多重不对称PCR、寡核苷酸芯片

所属期刊栏目：38

分类号：Q789;R155.5(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省自然科学基础研究计划项目2015JM3112;西安市社会发展引导计划——医学研究项目SF15162

在线出版日期：2017-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：290-295