重组大肠杆菌合成光学纯L-苯基乳酸

摘要：

以巨大芽孢杆菌Z2013513基因组DNA为模板,分别PCR扩增得到L-乳酸脱氢酶基因(ldhL)和葡萄糖脱氢酶基因(gdh),将gdh与ldhL分别连接至表达载体pETDuet,获得共表达质粒pETDuet-ldhL-gdh.经转化和验证获得重组菌大肠杆菌BL21 (DE3) /pETDuet-ldhL-gdh.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和比酶活力分析表明重组蛋白L-乳酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶均成功表达且具有酶活力.在37℃、200r/min条件下,经60 min反应,催化底物苯丙酮酸合成24.26 mmol/LL-苯基乳酸.产物L-苯基乳酸光学纯度(＞99％),底物摩尔转化率(59.55％),结果表明此重组体系可用于高效合成高光学纯L-苯基乳酸.

关键词：L-2-羟基-3-苯基丙酸、巨大芽孢杆菌Z2013513、L-乳酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、NADH再生、全细胞催化

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分类号：TS201.2(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金项目31501459;国家自然科学基金面上项目31470092;江苏省基础研究计划自然科学青年基金项目BK20130380;常熟市科技计划项目CN201412

在线出版日期：2017-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：59-64