单增李斯特菌nox基因的克隆、表达以及功能

摘要：

以GenBank中报道的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)野生型菌株EGDe的nox基因(GenBankID:986631)为研究对象,探讨在高等动植物中普遍存在的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在Lm中是否也可以介导产生活性氧(reactive oxygen species,ROS).首先通过诱导nox基因在BL21中表达产生Nox蛋白,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot鉴定该蛋白质分子质量;然后构建过表达菌株EGDe-nox,测定ROS产生情况,并使用实时荧光定量-聚合酶链式反应检测nox基因的过表达对Lm毒力基因表达的影响.结果表明,经鉴定Nox蛋白分子质量约为33 kD,过表达菌株EGDe-nox与对照组EGDe的ROS产生量相比并无多大变化,nox基因的过表达会导致与侵袭相关的基因actA、inlA和inlB以及毒力基因prfA的表达上调.由此推测,该Nox蛋白不能独立主导ROS的产量,但其过表达却可以增强毒力基因表达上调.本研究为继续探讨细菌中Nox的作用提供一定的参考依据.

关键词：单增李斯特菌、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶、nox基因、活性氧

所属期刊栏目：38

分类号：Q935(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31371776

在线出版日期：2017-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：46-51