叶瓜参长链碱抑制3T3-L1前脂肪细胞分化作用机制

摘要：

目的:研究叶瓜参长链碱(long-chain base from the sea cucumber Cucumariafrondosa,Cf-LCB)对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用,并探讨其作用机制.方法:以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测Cf-LCB对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性的影响;采用传统鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响;反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(quantity real-time reverse transcript polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测脂肪细胞分化关键基因CCAAT增强子结合蛋白αt (CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EB Pα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)以及WNT/β-catenin通路关键基因WNT10b (wingless-type MMTV integration site family members)、卷曲蛋白l(frizzled protein1,FZ1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6 (LDL-receptor-related protein6,LRP6)和β-连环蛋白(β3-catenin)的mRNA表达水平;Western blotting法检测WNT/β-catenin通路关键基因LRP6和β-catenin的蛋白表达量.结果:Cf-LCB能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;抑制3T3-L1细胞脂滴形成以及C/EBPα和PPARγ mRNA表达;显著上调WNT/β-catenin通路关键基因FZ1、LRP6和β-catenin mRNA表达,对WNT10b的表达无影响;显著促进RP和β--catenin的蛋白表达,提高核内β-catenin含量.结论:Cf-LCB能够显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,其作用机制与激活WNT/β-catenin通路有关.

关键词：叶瓜参、长链碱、3T3-L1前脂肪细胞、分化、WNT/β-catenin信号通路

所属期刊栏目：36

分类号：R282.77(中药学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31371876,31201329

在线出版日期：2016-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：241-246