实时荧光环介导等温扩增技术检测乳粉中的肺炎克雷伯氏菌

摘要：

为了建立食品中肺炎克雷伯氏菌灵敏快速的检测方法,根据GenBank中已公布的肺炎克雷伯氏菌phoE基因设计引物,利用实时荧光监测仪,建立实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测食品中肺炎克雷伯氏菌的方法,可直观判定检测结果,仪器亦可自动显示检测结果.对该检测方法的特异性、灵敏度等方面进行研究,并与聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法进行比较.结果表明,实时荧光LAMP检测方法特异性强、灵敏度高.用于特异性实验的21株实验菌株中,4株肺炎克雷伯氏菌,呈现阳性结果,而其他17株非肺炎克雷伯氏菌,均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度和检测人工污染乳粉的检出限分别为79 CFU/mL和79 CFU/g,是常规PCR检测方法的100倍.总之,本研究建立的实时荧光LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、耗时短、结果判定直观,实现了对肺炎克雷伯氏菌的快速检测.

关键词：肺炎克雷伯氏菌、pho基因、实时荧光环介导等温扩增、检测、SYBR Green Ⅰ

所属期刊栏目：35

分类号：TS207.4(食品工业)

资助基金：河北省自然科学基金项目C2008000216

在线出版日期：2014-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：192-197