肠出血性大肠杆菌O157∶H7变种Q蛋白对志贺毒素表达的影响

摘要：

1株肠出血性大肠杆菌O157∶H7变种EC169菌株,携带stx基因但不表达志贺毒素.通过高效热不对称交错聚合酶链式反应(high-efficiency thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,hiTAIL-PCR) hiTAIL-PCR扩增得到EC169 stx1及其上游核苷酸片段并克隆测序,结果表明:EC169 q基因与标准株sakai q基因相比存在6个SNP位点.通过PCR扩增O157∶H7高毒株EC150 q基因全长,并构建表达载体pkk223-q分别转化EC169和低毒株EC157.反转录荧光定量PCR实验结果表明,外源q基因在EC169和EC157重组菌中可高效表达,并引起EC157stx转录水平上调,但EC169重组菌stx转录水平不变.反向乳胶凝集实验结果亦证实EC157重组菌志贺毒素表达量提高,而EC 169重组菌志贺毒素表达量不变.Q蛋白变异可能并非EC169志贺毒素不表达的主要原因.

关键词：大肠杆菌O157∶H7、Q蛋白、反转录荧光定量PCR、志贺毒素、hiTAIL-PCR

所属期刊栏目：35

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划项目2012AA101703-3;教育部留学回国人员科研启动基金项目教外司留20111139;湖北省教育厅优秀中青年人才计划项目Q20111710;武汉市科技局国际科技合作计划项目2013030409020113

在线出版日期：2014-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：151-155