碎囊毛霉产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的分离纯化及其酶学性质

摘要：

基于碎囊毛霉M-28固态发酵方式,采用单因素试验对其所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行提取纯化条件优化,并开展部分酶学性质研究.结果表明:用pH 5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液在200 r/min浸提固态发酵基质30 min,所得粗酶液经饱和度80％硫酸铵盐析、24 h透析浓缩、Sephadex G-100柱层析分离后,经紫外分光光度计检测,得到2个蛋白峰,酶活力测定发现有一个峰具有酶活性,收集该酶活组分并采用聚乙二醇高度吸附浓缩,再用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度检验,纯化酶蛋白呈单一谱带,分子质量约为17.2 kD,酶比活力达到225.02 U/mg,纯度较粗酶液提高了2.48倍.酶的最适反应温度为55℃、在40～50℃时相对稳定,其最适pH值为5.5、酶活力在pH 4.5～5.5条件下相对稳定.Fe3+和Al3+对该酶具有明显抑制作用,Fe2+对其有激活作用,其他金属离子影响不大.

关键词：碎囊毛霉、β-1、3-1、4-葡聚糖酶、分离纯化、酶学性质

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分类号：TS262.5(食品工业)

资助基金：甘肃省科技重大专项计划项目1002NKDH029:甘肃省自然科学基金项目1107RJZA128

在线出版日期：2014-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：143-148