10.7506/spkx1002-6630-201408039
脱氧雪腐镰刀菌烯醇模拟表位的2种融合蛋白的表达及其在无毒酶联免疫吸附方法中的应用
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的模拟表位(CDON),是从噬菌体展示随机肽库中淘选出来的七肽,可模拟DON与抗DON抗体结合.为了在酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)中用重组蛋白替代DON偶联物,以期开发出能代替偶联DON人工抗原的无毒检测DON的ELISA方法,通过构建重组表达载体pGEX-CDON和pC89S4-CDON,并在大肠杆菌表达系统中分别表达和纯化GST-CDON和pⅧ-CDON融合蛋白,比较测定2种融合蛋白与抗DON抗体的结合效果.ELISA方阵滴定结果显示:纯化的融合蛋白具有良好的反应原性.在间接竞争性ELISA中,当以融合蛋白GST-CDON为包被抗原时,检测限为31 ng/mL,线性范围为31~500 ng/mL,IC50为194 ng/mL,加标回收率为54.1%~65.4%,变异系数为6.28%~13.37%;当以融合蛋白pⅧ-CDON为包被抗原时,检测限为15 ng/mL,线性范围为15~500 ng/mL,IC50为94 ng/mL,加标回收率为81.7%~89.0%,变异系数为3.15%~7.55%.
脱氧雪腐镰刀菌烯醇、模拟表位、质粒、噬菌粒
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Q819(生物工程学(生物技术))
江西省自然科学基金项目20122BAB214006;江西省教育厅科技项目GJJ13573
2014-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
198-203