应用DPO-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7

摘要：

利用双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7.根据DPO引物设计原则,以肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因为靶基因设计一对DPO引物,经过反应体系的优化,建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DPO-PCR检测方法,其检测灵敏度约为94 CFU/mL.与常规PCR方法相比,所建立的DPO-PCR方法对退火温度不敏感,在引物设计和实验过程中不需要对引物及其退火温度反复优化,同时基于DPO引物的特殊结构又增强了其特异性.DPO-PCR方法设计简易、特异性强,为致病性微生物的快速准确检测提供了新途径.

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7、rfbE基因、双启动寡核苷酸引物聚合酶链式反应

所属期刊栏目：35

分类号：TS207.3(食品工业)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2012IK157;质检公益性行业科研专项201310126

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：160-164