丝瓜多酚氧化酶的分离纯化及酶学性质

摘要：

从丝瓜中分离纯化出多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO),并对其部分酶学性质进行研究.采用硫酸铵分级盐析、透析、DEAE-Cellulose DE-52离子交换层析和SephadexG-75分子筛凝胶过滤层析分离纯化丝瓜PPO.纯化所得酶的比活力为957.9 U/mg,纯化倍数为28.3,酶活力回收率为18.5％;十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)检测结果显示该酶蛋白呈单一条带,为单亚基蛋白,其分子质量约为67.8 kD,且无同工酶;该酶最适pH6.0,最适温度30℃,以左旋多巴(L-dopa)为底物,其米氏常数(Km)为1.32 mmol/L,最大反应速率(Vmax)为0.22 OD475nm/min.

关键词：丝瓜、多酚氧化酶、分离纯化、酶学特性

所属期刊栏目：35

分类号：S642.4;TS255.36

资助基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目CXZZ12_0544

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：187-191