苦荞10 kD过敏原的重组表达及部分性质分析

摘要：

以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦养10kD过敏原基因序列TBAP10(tartary buckwheat 10 kD allergen protein,TBAP10; GenBank登录号JK729379.1)为基础,构建重组表达载体pET4 7b-TBAP10,重组蛋白在大肠杆菌BL21 Star (DE3)中以包涵体形式表达.经包涵体复性和钴离子螯合层析纯化目的蛋白,并对其过敏活性、热稳定性及在模拟胃肠环境中的稳定性进行了分析.Western blotting显示该蛋白与苦荞16kD过敏蛋白Fag t2存在免疫交叉反应.竞争性ELISA证明重组蛋白TBAP10具有与荞麦过敏患者血清IgE特异的结合活性;TBAP10具有强的热稳定性,能耐受15 min的沸水浴;模拟胃肠环境的消化结果显示TBAP10对胃蛋白酶具有强的耐受性,但对胰蛋白酶无耐受性.

关键词：原核表达、过敏蛋白、免疫性质、模拟胃肠消化

所属期刊栏目：35

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目30400282,31171606;西北农林科技大学基本科研业务费专项QN2009064

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：128-133