多基因串联表达木糖发酵工程菌株的构建

摘要：

通过基因工程的手段,利用木糖发酵转化乙醇是近年来研究的热点.为引入木糖向木酮糖转化的途径,采用多重拼接PCR方法将木糖向木酮糖转化有关的木糖还原酶基因(xyl1)、木糖醇脱氢酶基因(xyl2)与转醛酶基因(tal1)进行拼接后克隆到表达载体pAUR123中,获得融合表达载体pAUR123-X12A;为超表达下游代谢途径的基因,将控制木酮糖向乙醇转化的木酮糖激酶基因(xks1)与转酮酶基因(tkl1)进行拼接后克隆到表达载体pAUR123中,获得融合表达载体pAUR123-SK.通过乙酸锂电击转化的方法分别将pAUR123-X12A与pAUR123-SK转入S.cerevisiae INVSc1中,得到S.cerevisiae INVSc1-X12A与S.cerevisiae INVSc1-SK重组子.对构建的重组子进行表达后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和酶活性分析,目的基因获得表达.初步结果显示两株重组菌构建成功.

关键词：多基因串联、木糖、表达、酿酒酵母

所属期刊栏目：34

分类号：TS261.11(食品工业)

资助基金：新疆维吾尔自治区科技支疆项目计划指令性项目201091132;农业部引进“国际先进农业科学技术”项目2010-Z46;农业部高粱产业技术体系建设项目nycytx-12-03-01-01

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：180-185