枯草芽孢杆菌角蛋白酶kerC基因在毕赤酵母中的高效表达

摘要：

以角蛋白酶基因为研究对象,构建毕赤酵母(Pichia pastoris)稳定的高效表达系统.采用PCR方法从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-3中克隆得到角蛋白酶基因kerC,将其构建在毕赤酵母表达载体pPICZαA上,得到重组质粒pPICZαA-kerC,转入毕赤酵母X-33中,成功实现了角蛋白酶基因kerC在真核表达系统中的高效表达.重组菌株以体积分数1％的甲醇诱导培养108h后,酶活力可达32.31U/mL,提高了11.15倍.重组酶最适温度为60℃,最适pH值为7.5,反应体系中3mmol/L的Co2+、Fe2+和Ca2+能明显增强其酶活力.SDS-PAGE检测表明,重组酶分子质量约为31kD.

关键词：枯草芽孢杆菌、角蛋白酶、kerC基因、毕赤酵母、高效表达

所属期刊栏目：34

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：262-266