鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备

摘要：

利用PCR扩增出鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fliC,连接到原核表达载体pET28a(+)上,测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21 (DE3)pLysS感受态细胞中,构建了原核表达系统.经1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导及Ni-NTA纯化后,得到了带6×His纯化标签的分子质量大小约为54.6kD的表达产物,和预测蛋白大小一致,且大部分表达产物以可溶形式存在.利用Western-blotting进一步鉴定,结果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应.用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体,并对抗血清的效价和特异性进行检测,结果表明,多抗的效价较高,特异性较好.

关键词：鼠伤寒沙门氏菌、鞭毛蛋白FliC、原核表达、纯化、鉴定、多克隆抗体

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-42;国家自然科学青年基金项目31000799;"十二五"国家科技支撑计划项目2012BAD28B03

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：180-184