集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶假定底物的体外诱导表达及纯化

摘要：

金属蛋白酶S2P同源蛋白在行光合作用的蓝藻中广泛存在.S2P蛋白酶通过在膜切割转录调控因子(anti-σ因子),释放σ因子来参与胁迫响应是跨膜信号转导的保守机制.集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶参与胁迫响应的跨膜信号转导,但其作用机理及底物均未明确.经过深入考察分析,实验锁定了4对σ因子和anti-σ因子的组合:SigE-ChlH(Slr1055)、SigI(Sl10687)-Sl10688、SigG(Slr1545)-Slr1546及SigH(Slr0856)-Sl10857.以pET-30b(+)为载体,通过重组表达纯化,成功获得一系列S2P假定底物的重组蛋白:全长anti-σ因子及截去羧基端部分序列的截短片段,包括Slr1055、Slr1055△(1～232)、Sl10688、Sll0688△(1～152)、Slr1546、Slr1546△(1～174)、Sl10857、Sl10857△(1～101)和大肠杆菌的S2P底物RseA(1～148).为下一步在体外重构S2P蛋白酶与底物的酶切体系、阐释蓝藻体内S2P介导的级联信号转导机制奠定了基础.

关键词：第二位点蛋白酶(S2P)、底物、anti-σ因子、原核表达、纯化

所属期刊栏目：34

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目31270085

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：114-120