发酵乳杆菌细胞壁蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究
研究分离纯化发酵乳杆菌细胞壁蛋白酶（cell envelope proteinase,CEP）的方法及其酶学性质。用50mmol/LTris-HCl缓冲液（pH7.8）悬浮菌体,进行超声波破碎,细胞质量浓度为0.06g/mL,破碎功率330W,工作220次（工作时间3s,间隔时间5s）,离心取上清液即为粗酶液。60%硫酸铵沉淀,Sephacryl S-300 HR凝胶层析,Native-PAGE割胶回收纯化发酵乳杆菌的CEP。用纯化的CEP酶解脱脂乳,酶解液ACE（angiotensin I-converting enzyme）抑制率为50%。SDS-PAGE检测CEP分子质量为32.5kD,最适酶反应温度为41℃,最适酶反应pH值为8.0。Mg2＋、Co2＋、Ca2＋对CEP活性有激活作用;Zn2＋、Ni2＋、PMSF、EDTA对CEP活性有抑制作用,说明CEP为丝氨酸蛋白酶且酶的活性中心结构的维持与金属离子有关。
发酵乳杆菌、细胞壁蛋白酶、纯化、酶学性质
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TS201.3(食品工业)
国家自然科学基金30972130;江苏省科技支撑计划项目BE2009366;浙江省重大科技专项2010C12015
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
262-268
