牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达
探索牛β-防御素BNBD11原核表达及纯化的技术路线。根据已报道的BNBD11的氨基酸序列,兼顾大肠杆菌密码子偏好性,设计合成BNBD11基因。构建重组表达载体pET32a-BNBD11,转入E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。经SDS-PAGE检测融合蛋白结果显示,大部分表达产物以可溶形式存在,用Ni Sepharose柱层析纯化融合蛋白。融合蛋白经甲酸切割后,再次用Ni Sepharose柱层析去除带有His-Tag的杂蛋白,最终得到纯化的重组BNBD11。实验实现了BNBD11在大肠杆菌中的融合表达,并纯化了获得的重组BNBD11。
β-防御素、BNBD11、融合表达、大肠杆菌
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Q786(基因工程(遗传工程))
西北农林科技大学引进人才启动专项基金01140407;2009年西北农林科技大学基本科研业务费青年项目109021003;2010年温州市科技计划项目S20100016
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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