Nisin抗性菌株的筛选及其抗性基因的克隆

摘要：

利用乳酸链球菌肽（Nisin）抗性基因常与乳糖利用基因位于同一质粒上这一特性,在含300IU/mL Nisin和质量浓度为0.004g/100mL溴甲酚紫的选择性培养基上,从新鲜牛奶中初筛到5株Nisin抗性菌株。经脱脂乳培养基培养、革兰氏染色和镜检,初步确定为乳球菌。分别以5株抗性菌株的基因组和质粒DNA为模板,采用PCR对其Nisin抗性基因（NSR）保守序列进行了扩增,从其中3株抗性菌株（分别命名为N1、N2、N3）的质粒DNA上得到大小约400bp的目的基因产物。经16S rDNA鉴定,进一步确定3株抗性菌株均为乳酸乳球菌。分别以N1、N2、N3的质粒为模板,采用PCR扩增其全长NSR基因,均得到大小约1000bp的目的产物。将从N1得到的NSR基因全长产物与pMD-19T进行连接测序,结果显示,其与已发表序列的相似性达99%,可确定其为NSR基因,且位于抗性菌株N1的质粒上。

关键词：Nisin抗性菌株、筛选、Nisin抗性基因(NSR)、克隆

所属期刊栏目：32

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：河南省高校杰出科研人才创新工程资助项目2006KYCX008

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：156-160