大肠杆菌O157:H7特异基因的实时荧光定量PCR检测
为建立快速、特异的检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chainreaction,RT-PCR)方法,针对大肠杆菌O157:H7的特异基因rfbE设计一对特异引物,建立SYBR Green I实时定量PCR检测方法,并进行灵敏度、重复性和特异性实验,同时与常规PCR方法进行比较.结果显示所建立的SYBRGreen I实时定量PCR方法可以快速、特异地检测出大肠杆菌O157:H7,细菌纯培养物中其灵敏度可达2×10<"1>CFU/mL,临床模拟污染肉样中能最低能检测到1 × 10<'>2CFU/mL的大肠杆菌O157:H7.与常规PCR方法相比,SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法对临床样品中大肠杆菌O157:H7的检出率大大提高.本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术能快速准确、特异、敏感地检测大肠杆菌O157:H7.
大肠杆菌O157、H7 rfbE基因、SYBR GreenⅠ、实时PCR
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R378.21(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
河南省重大公益科研项目81100912300;"十一五"国家科技支撑计划项目2007BAQ01047;漯河市科技计划项目081203
2014-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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