大肠杆菌中表达CrylC基因及其重组表达产物的纯化及复性

摘要：

通过PCR方法将苏云金芽孢杆菌CrylC基因从原始质粒中克隆出来.由于CrylC基因携带了大量大肠杆菌稀有密码子,因此用PCR方法对其前86个密码子进行修改,以提高其在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量.CrylC蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式大量表达,将包涵体用8mol/L尿素溶解并用His Trap(TM)FF凝胶柱纯化.所得纯化蛋白在复性缓冲液中复性折叠,最终得到可溶并有生物活性(由三化螟活性实验验证)的蛋白.CrylC蛋白纯度可达99.2%.

关键词：CrylC蛋白、稀有密码子、包涵体、表达、纯化、复性折叠

分类号：Q344.13(遗传学分支学科)

资助基金：农业部转基因生物重大专项2008ZX08011-005,2009ZX08011-001B

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：211-215