碱性芽饱杆菌木聚糖酶基因的克隆及表达
本实验从广西红树林土壤中筛选出一株产木聚糖酶的耐碱菌HSL38,经过16S rDNA鉴定,其与碱性芽孢杆菌Bacillus halodurans C-125(GenBank:NC_002570.2)的同源性达到99%.参考Bacillus halodurans C-125的,8-1,4木聚糖酶基因xynA设计引物,扩增出HSL38中的8-1,4-木聚糖酶基因xyl-BH-G10,其与xynA的同源性达到99%,编码396个氨基酸残基(45.27kD),属于糖基水解酶GH 10家族.将xyl-BH-G10基因与表达载体pET-30a-c(+)连接,构建重组载体,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白.结果表明,在最佳诱导条件下,木聚糖酶基因xyl-BH-G10在大肠杆菌细胞内高效表达,酶活力达到55.28U/mL,是原菌株HSL38发酵液酶活力的4倍.
碱性芽孢杆菌、木聚糖酶、克隆、表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家公益性行业农业科研专项200803033
2014-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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