表面活性剂稳定性碱性蛋白酶纯化及性质研究

摘要：

从地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)XG12发酵液中分离纯化表面活性剂稳定性碱性蛋白酶,并对酶学性质进行研究.利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析等方法,分离纯化到了均一的酶蛋白,酶纯度提高了42.6倍,回收率为25.3% SDS-PAGE及Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析显示酶蛋白为单亚基蛋白,分子质量约为29.5kD.在pH7.0～11.0范围内酶活性及稳定性较高,最适作用pH值为10.0,最适作用温度40℃.Mg2+、Ca2+、及Mn2+对酶有明显激活作用.丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂强烈抑制酶活性,表明所纯化到的蛋白酶为丝氨酸蛋白酶.酶分别对终质量浓度为0.1g/l00mL的阴离子表面活性剂SDS、阳离子表面活性剂CTAB和体积分数为1%的非离子型表面活性剂 Tween-80、Tween-20、Triton X-100以及氧化剂均具有很强的稳定性.

关键词：地衣芽抱杆菌XG12、碱性蛋白酶、分离纯化、表面活性剂、酶学性质

所属期刊栏目：32

分类号：Q814.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：徐州工程学院青年培育基金项目XKY2009123

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：211-216