重组花生过敏原Ara h2的生物合成
为获得重组花生过敏原Ara h 2.通过RT-PCR合成cDNA,并以此为模板进行PCR扩增目的基因Ara h 2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-T Simple载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h 2.上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h 2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL中,经IPTG诱导表达.SDS-PAGE电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符.通过Glutathione Sepharose 4B凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h 2,获得融合蛋白纯度约为90%.Western blotting分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h 2兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性.
食物过敏、花生过敏原Ara h2、生物合成
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Q786(基因工程（遗传工程）)
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室目标导向项目SKLF-MB-200807;江西省主要学科学术和技术带头人培养项目[2004]234号;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-08-07-04
2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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