重金属铅多克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的:合成铅离子完全抗原,并对其进行鉴定;用合成的完全抗原免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定效价和特异性.方法:用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Pb2+与载体蛋白BSA和OVA偶联在一起,合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA),并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP)检测抗原中Pb2+含量,以及通过免疫Balb/c小鼠,采集血清进行间接ELISA和竞争ELISA检测.结果:两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后,紫外吸收峰偏移等现象;免疫的4号和5号Balb/c小鼠的抗血清效价达1:400000;与OVA无交叉反应,ELISA检测IC50值为1.5ng/mL,与Fe3+有近5%的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于1%.结论:铅离子多克隆抗体制备成功.

关键词：铅离子、合成抗原、ELISA、多克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家"863"计划项目2008AA10Z427;广州市天河区科技计划项目085G079

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：180-183