抗黄曲霉毒素B1单链抗体的表达载体的比较
目的:比较4种不同的pET载体在表达抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单链抗体(scFv)克隆的特点,确定用以表达scFv-H4的合适载体.方法:将目的基因H4分别克隆到载体pET20b、pET22b、pET28a和pET32a上,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)或Origami(DE3)中,比较诱导过程中细胞的生长状况和诱导结束后细胞破碎液中scFv-H4的生物活性以及细胞各部分包涵体.结果:pET20b和pET22b能表达具有生物活性的scFv-H4,这些具有生物活性的蛋白主要存在于周质中;pET28a和pET32a不能表达有生物活性的scFv-H4,而pET32a仅能在细胞质中产生大鼍的包涵体.结论:pET22b可能是表达AFB1的单链抗体较优的表达载体.
黄曲霉毒素、单链抗体、表达、大肠杆菌、PET
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Q782(基因工程(遗传工程))
教育部新世纪人才计划资助项目NCET-06-0482
2014-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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171-176