一种高温细菌葡聚糖磷酸化酶的性质研究(Ⅱ)

摘要：

为认识和应用极端嗜热细菌腾冲嗜热厌氧杆菌(T.tengcongensis MB4~T)产生的葡聚糖磷酸化酶(Tte-GlgP)的性质,用电喷雾质谱法(ESI-MS)测定Tte-GlgP的底物谱.结果表明:纯化后的Tte-GIgP有较广的底物范围,能将可溶性淀粉、麦芽糊精、糖原、麦芽七糖、麦芽五糖和麦芽三糖底物转化为1-磷酸葡萄糖(G-1-P).用改进后的双酶法测定Tte-GlgP对上述底物的转化效率,以产生的G-1-P的量为指标(μmol/L),在相同的实验条件下,以麦芽七糖和麦芽五糖为底物时,转化效率相对高,分别为86.83μmol/L和85.79μmol/L;糊精和可溶性淀粉次之,分别为82.9μmol/L G-1-P和69.68μmol/L G-1-P;最低的分别为糖原和麦芽三糖,产生的G-1-P分别为45.81 μmol/L和43.60μmol/L.两种分析方法均证明麦芽寡糖、麦芽糖糊精和淀粉为Tte-GlgP的最适底物.以上述双酶法为酶活性测定方法,测得在体系pH8.0时,Tte-GlgP的活性最高;在最适pH值条件下以可溶性淀粉为底物时Tte-GlgP催化反应的最适温度为60℃;在60℃保温6h后,Tte-GlgP仍然有90%的活性残留,说明Tte-GlgP具有热稳定性.

关键词：Tte-GlgP、底物谱、最适pH值、最适温度、热稳定性

所属期刊栏目：31

分类号：Q555.4(酶)

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：215-218