重组弹性蛋白酶诱导表达、纯化及酶学特性研究

摘要：

将已构建好的表达载体pPIC3.5K/PAE转化毕赤酵母KM71,经甲醇诱导表达弹性蛋白酶,通过对发酵条件的初步优化,确定毕赤酵母重组菌株表达的最佳条件为:甲醇浓度1%,最佳诱导时间4d.通过DEAE-SepharoseFF弱阴离子交换柱一步纯化,获得良好的纯化效果.该重组蛋白酶最适pH值范围6.0～8.5,最适温度范围为25～40℃,催化反应条件温和.Ca2+和Mg2+对重组弹性蛋白酶活性有不同程度的促进作用,Zn2+、Cd2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Cu2+和EDTA对该酶有不同程度的抑制作用.

关键词：弹性蛋白酶、诱导表达、纯化、酶学特性

所属期刊栏目：30

分类号：Q786;Q556.9;Q814.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家"863"计划项目2006AA10Z440;农业部"948"项目2007-Z8

在线出版日期：2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：227-231