新型恒温核酸扩增法快速检测副溶血性弧菌的研究

摘要：

利用DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)设计一对外引物和一对内引物,通过引物特异性识别tlh基因上的六个独立区域来快速检测副溶血弧菌.同时将检测结果与PCR方法进行比较.结果表明,LAMP反应在65℃恒温条件60min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;肉眼观察阳性结果出现白色混浊现象,添加1×SYBR Green Ⅰ荧光染料后,绿色的阳性结果很明显区别于橙色阴性结果;LAMP方法的最低检出限为IOCFU/ml,PCR方法为103CFu/ml,LAMP方法检测灵敏度是PCR方法的100倍.因此,LAMP方法用于快速检测副溶血弧菌具有检测过程简单、反应结果肉眼即辨别并且灵敏度高特异性强的特点.实验装置简便,能够提供稳定热源即可,所以LAMP方法特别适合于现场快速诊断.

关键词：副溶血性弧菌、DNA介导恒温核酸扩增法、tlh基因

所属期刊栏目：29

分类号：TS207.4(食品工业)

资助基金：广东省科技厅农业公关计划项目2005A11601101

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：382-385