水稻密码子优化的cry2A*基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化

摘要：

通过PCR从克隆载体puC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*,经限制性内切酶Nde I和BamH I双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a(+),成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a(+)/Cry2A*,并转入人肠杆菌BL21(DE3)中.通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时问为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达.采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度达到95%.

关键词：抗虫基因、cry2A*、转基因水稻、表达、纯化

所属期刊栏目：29

分类号：TS201.1(食品工业)

资助基金：国家863计划项目2006AA102440;农业部948项目2005-Z32

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：267-271