重组N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的表达条件优化

摘要：

N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶(N-acetylornithine deacctylase,NAOase)为新型氨基酸拆分酶,可在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中胞内诱导表达.为降低生产成本并提高酶活,优化了培养基成分及诱导条件.结果表明,进口的蛋白胨和酵母膏明显优于国产原料.5.0g/L的乳糖可以代替昂贵的IPTG(isopropy 1β-D-1-Thiogalacto pyranoside,异丙基β-D硫代半乳糖苷)起到有效的诱导效果.最佳碳源为1.0g/L甘油,氮源为15.0ml/L玉米浆和5.0g/L蛋白胨.NAOase大多以不可溶的包涵体形式表达,少量为可溶的活性表达.降低诱导温度可增大活性表达的比例,而整菌表达量也随之降低.22℃诱导10h为活性表达的最适条件,生物量为6.91,酶活为392.65U/ml,分别为优化前的1.65倍和5.72倍.

关键词：N.乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶、表达优化、包涵体、可溶性部分酶活

所属期刊栏目：29

分类号：Q93(微生物学)

资助基金："973"计划项目2003CB7160004

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：239-243