10.3321/j.issn:1002-6630.2007.03.044
可用于基因检测的啤酒发酵液DNA提取方法研究
用玻璃珠法、溶菌酶法、冻融法、氯化苄(phCH2Cl)法提取啤酒发酵液、生产用啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、K氏酵母、啤酒生产污染细菌(T)、G-细菌(E.coli.DH5α)和G+细菌(Bacillus YK-1R)的基因组DNA.溶菌酶法和冻融法对细菌的裂解率为99%~100%,对酵母的裂解率只有15%~28%;玻璃珠法对酵母的裂解率为92%~94%;phCH2CI法对细菌和酵母的裂解率均为100%.对提取的啤酒发酵液基因组DNA浓度进行测定,结果为:玻璃珠法15.4 g/ml、溶菌酶法18.0 g/ml、冻融法13.8 g/ml、phCH2Cl法40.7 g/ml.电泳检测结果表明,除冻融法外,其余3种方法得到的混合菌DNA片段均大于23 kb,无拖尾、无蛋白污染.phCH2CI法图谱更清晰,DNA得率108 μg/g湿菌体,RAPD-PCR图谱重复性好.为用基因诊断技术在线检测啤酒发酵过程中微生物污染,提供了一种可靠的DNA提取方法.
啤酒发酵液、DNA提取方法、PCR扩增
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Q93(微生物学)
山西省科技攻关项目041147
2007-04-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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