基于适配体拉曼光谱技术快速检测肠炎沙门氏菌方法

摘要：

目的:应用SELEX技术筛选高亲和力、高特异性适配体,利用该适配体结合拉曼光谱技术建立肠炎沙门氏菌快速检测方法.方法:采用全细菌指数富集的配体系统进化技术(whole-bacteria systematic evolution of ligands by exponential enrichment,whole-bacteria-SELEX)筛选肠炎沙门氏菌特异性核酸适配体,并采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)与SERS技术对筛选出的适配体亲和力及特异性进行评价,建立肠炎沙门氏菌检测方法.结果:本研究通过对肠炎沙门氏菌进行十五轮SELEX筛选,并通过ELISA对其亲和力进行评价,筛选出Aptamer4、Aptamer10、Aptamer12三条候选适配体,并通过SERS技术确认Aptamer4为亲和力最佳适配体;将Aptamer4与肠炎沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌等5种混合菌结合,结果表明,通过SERS技术可特异的检测出肠炎沙门氏菌,且该方法重复性较好,其最低检测限的细菌浓度为102 CFU/mL.且在猪肉样品的检测中,肠炎沙门氏菌的回收率为93.37％ ～ 100.18％.结论:应用SELEX方法成功筛选出与肠炎沙门氏菌高特异性、高亲和力适配体,并建立基于表面增强拉曼光谱技术快速检测肠炎沙门氏菌的方法,该方法特异性强、灵敏度高、成本低、快速简便,可应用于食品加工过程中肠炎沙门氏菌的快速检测.

关键词：肠炎沙门氏菌、快速检测、适配体、表面增强拉曼光谱(SERS)、酶联免疫吸附

所属期刊栏目：41

分类号：TS207.4(食品工业)

资助基金：国家科技重点研发专项;高致病病原动物模型及应急支撑关键技术研究

在线出版日期：2020-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：225-230,285